小膠質(zhì)細胞的表征
神經(jīng)免疫學是一門研究發(fā)育期間、體內(nèi)穩(wěn)態(tài)和損傷或感染反應期間神經(jīng)和免疫系統(tǒng)相互作用的學科。免疫細胞在神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)中具有至關(guān)重要的意義，例如小膠質(zhì)細胞的突觸修剪是神經(jīng)可塑性的重要組成部分。損傷、感染或內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡可導致神經(jīng)炎癥和小膠質(zhì)細胞活化，進而吞噬死亡或正在死亡的神經(jīng)元和感染因子。慢性神經(jīng)炎癥被認為是許多神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茲海默癥）的誘因，因此小膠質(zhì)細胞的長期活化會危及神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。
Incucyte? 活細胞分析系統(tǒng)能對小膠質(zhì)細胞進行各類形態(tài)學和功能表征。其全自動化圖像采集和分析有助于對凋亡神經(jīng)元的小膠質(zhì)細胞胞葬作用或生物顆粒吞噬作用進行可視化和動力學分析。小膠質(zhì)細胞在趨化細胞因子作用下的遷移可以通過活細胞趨化遷移和侵襲實驗進行可視化和量化。無干擾型試劑可以維持細胞形態(tài)不受終點分析的干擾和限制，因而能直接以 96 和 384 孔的通量從培養(yǎng)箱中不間斷培養(yǎng)的每個細胞中收集更多數(shù)據(jù)。
介紹神經(jīng)免疫功能的Incucyte?分析方法
Incucyte??吞噬實驗
- 生成被吞噬細胞的定量、可重復和特異性的測量數(shù)據(jù)
- 通過圖像和視頻觀察和驗證吞噬細胞對細胞碎片和死亡神經(jīng)元的動態(tài)清除
使用 Incucyte? pHrodo? 橙色細胞標記試劑盒對目標進行無干擾型標記
- 使用您選擇的微孔板形式的模型高效地研究整個吞噬過程
Incucyte??趨化實驗
- 將實時趨化性測量與形態(tài)的視覺評價聯(lián)系起來，可更深入地研究細胞表型
- 僅需使用少量細胞在 96 孔板中分析敏感和罕見的細胞，重現(xiàn)性高
- 無需固定、染色或細胞刮拭步驟，即可測量無標記或有標記的細胞遷移
- 一站式解決方案，包括專用軟件和新型光學透明?Incucyte? ClearView 板
關(guān)鍵優(yōu)勢
觀察并驗證小膠質(zhì)細胞的吞噬
- 通過用 pH 敏感的熒光探針獲取的圖像和視頻觀察小膠質(zhì)細胞的吞噬情況。
- 該方法適用于凋亡細胞、細胞碎片、蛋白質(zhì)聚集體和生物顆粒的吞噬作用。
圖 1.觀察并驗證小膠質(zhì)細胞的吞噬。iPSC 源小膠質(zhì)細胞 (Axol BioSciences) 吞噬 pHrodo 橙色標記的凋亡 Neuro2A 細胞的延時可視化。 圖像驗證了凋亡的靶細胞進入小膠質(zhì)細胞的細胞質(zhì)的過程。 Neuro2A 靶細胞用?Incucyte??pHrodo 橙色細胞標記試劑盒標記，并用十字孢堿誘導凋亡。
對小膠質(zhì)細胞吞噬和胞葬作用進行實時量化
自動分離由 Incucyte? pHrodo? 橙色試劑發(fā)出的熒光信號
結(jié)合?Incucyte? pHrodo 橙色細胞標記試劑盒，實時分析凋亡的 Neuro2A 細胞或 β 淀粉樣蛋白聚合體的吞噬反應
評估吞噬調(diào)節(jié)劑的作用機制
圖 2.對小膠質(zhì)細胞吞噬作用進行實時量化。iPSC 源小膠質(zhì)細胞 (Axol Bioscience) 吞噬 pHrodo 標記的凋亡神經(jīng)元 (Neuro-2A) 的代表性熒光圖像。當靶細胞內(nèi)化為酸性吞噬體時，觀察到細胞內(nèi)橙色熒光增加；青色輪廓為分光遮片。pHrodo 標記的 Neuro2A 細胞的胞葬作用依賴于細胞數(shù)量。pHrodo 標記的 Aβ 聚集體的吞噬作用依賴于時間和濃度。
圖 3.吞噬調(diào)節(jié)機制的評價。BV-2 效應細胞胞葬凋亡的 Neuro2A 細胞（左圖）或大腸桿菌生物顆粒（中間圖）。細胞松弛素 D（上圖）對胞葬作用和吞噬作用均有濃度依賴性抑制作用， IC50 值分別為 0.16 μM 和 1.5 μM。相比之下，西侖吉肽（一種 aVb3 和 aVb5 整合素的抑制劑）選擇性地減弱了胞葬作用（IC50 值為 0.17 μM），且在實驗的最高濃度 (100 μM) 下對吞噬作用幾乎或沒有影響。這些數(shù)據(jù)支持了整合素在胞葬作用所需的細胞相互作用中發(fā)揮其功能，而不是細菌的吞噬作用。
評估小膠質(zhì)細胞的趨化性和遷移
用圖像和視頻觀察小膠質(zhì)細胞的趨化性
每個 96 孔趨化板僅需 1,000 至 5,000 個細胞，適用于數(shù)量少且昂貴的原代細胞群
圖 4.評估小膠質(zhì)細胞的趨化性和遷移。Incucyte??ClearView 板上 iPSC 源小膠質(zhì)細胞 (CDI) 的圖像。孔隙如藍圈所示（左圖）。小膠質(zhì)細胞向補體成分 5a (C5a) 的遷移有時間和濃度依賴性。
監(jiān)測分化或活化后的形態(tài)變化
追蹤單核細胞向小膠質(zhì)細胞分化過程中的形態(tài)變化
圖 5.iPSC 源單核細胞 (Axol BioScience) 分化為小膠質(zhì)細胞的形態(tài)學變化展示。注意小膠質(zhì)細胞的外觀變化。 12 天后，紅色箭頭所示為分支狀細胞，而黃色箭頭所示為較大的扁平變形蟲樣細胞。14 天內(nèi)每隔 2 天給予細胞分化培養(yǎng)基，每 6 小時采集 20 倍放大的時相圖。
訂購信息
訂購信息
應用 | 說明 | 商品目錄號 |
|---|---|---|
吞噬作用 | ||
Incucyte? pHrodo? 橙色細胞標記試劑盒，適用于吞噬作用 | 1 盒 | 4766 |
Incucyte? pHordo? 紅色細胞標記試劑盒 | 1 盒 | 4649 |
趨化作用 | ||
Incucyte? 趨化分析軟件模塊 | 1 個模塊 | 9600-0015 |
Incucyte? ClearView 96孔趨化板 | 1 塊板 | 4582 |
Incucyte? ClearView 96孔趨化板 – 10 塊裝 | 10 塊板 | 4648 |
所有應用 | ||
Incucyte? SX5 活細胞分析系統(tǒng) 包括圖像采集與分析系統(tǒng)：
| 1 套系統(tǒng) | 4816 |
