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圖 1. 追蹤與 T 細(xì)胞活化相關(guān)聯(lián)的細(xì)胞參數(shù)的變化。基于活化 T 細(xì)胞的細(xì)胞增大和形態(tài)變化進(jìn)行亞群分類(lèi)。 將 PBMC 用抗 CD3 和 IL-2 或溶媒對(duì)照進(jìn)行處理，并用 Incucyte^? S3 監(jiān)測(cè)隨時(shí)間的變化。 ?(A-D) 活化誘導(dǎo)平均細(xì)胞面積和離心率（所有細(xì)胞）發(fā)生時(shí)間依賴(lài)性增加。 ?注意離心率的變化先于面積的增加。 ?Cell-by-Cell 面積分布 (E) 和密度圖 (F-H) 突出顯示了活化后異質(zhì)性隨時(shí)間的增加，以及具有高離心率的大細(xì)胞群的出現(xiàn)。顯示的值為 12 個(gè)孔的平均值 ± SEM。

圖 2. 分析活化 T 細(xì)胞亞群：CD71 上調(diào)。(A-C) Cell-by-Cell 密度圖顯示 CD71（經(jīng) FabFluor-488 標(biāo)記）熒光在活化 T 細(xì)胞中隨時(shí)間和細(xì)胞面積（相）的增加而增加。 ?(D) 活化后 CD71+ 細(xì)胞（而非 CD4+ 細(xì)胞）比例的動(dòng)態(tài)變化。(E) 亞群分析顯示，與小細(xì)胞 (< 110 mm2) 相比，大細(xì)胞 (> 100 mm2) 中的 CD71 表達(dá)優(yōu)先上調(diào)。這些數(shù)據(jù)證明 CD71 表達(dá)發(fā)生活化誘導(dǎo)的時(shí)間依賴(lài)性增加，并且細(xì)胞大小與 CD71 之間存在強(qiáng)關(guān)聯(lián)，在活化 4 天后，> 90% 的大細(xì)胞表達(dá) CD71。

圖 3. 在 Incucyte^? S3 上，通過(guò)細(xì)胞鑒別和分類(lèi)進(jìn)行免疫表型驗(yàn)證。使用流式細(xì)胞術(shù)或使用 FabFluor-488 標(biāo)記抗體的活細(xì)胞免疫細(xì)胞化學(xué)分析，對(duì)來(lái)自 3 例供體的新鮮分離的 PBMC 中的六種 CD 標(biāo)志物和 IgG 對(duì)照進(jìn)行表征。 ?考慮到來(lái)自 3 例供體的平均值 (A) 或單獨(dú)供體的各個(gè)值 (B)，在兩種方法之間觀察到強(qiáng)相關(guān)性。

圖 4. 在 Incucyte^? S3 上使用 Cell by Cell 分析對(duì)各種細(xì)胞類(lèi)型中的 HER2 表達(dá)進(jìn)行表型分析。使用 FabFluor-488 標(biāo)記抗體對(duì) A549、SKOV-3 或 SkBr3 細(xì)胞的 HER2 表達(dá)進(jìn)行表征。圖像（頂行）和熒光定量（底行）表明，A549 細(xì)胞中缺乏 HER2 表達(dá)，SKOV-3 細(xì)胞中發(fā)生異質(zhì)性表達(dá)，SkBr3 細(xì)胞中則發(fā)生均一的高水平表達(dá)。同型對(duì)照響應(yīng)代表陰性細(xì)胞群。

圖 5. 生成適用于藥理學(xué)研究的穩(wěn)定的細(xì)胞周期階段數(shù)據(jù)。在順鉑或 5-氟尿嘧啶 (5FU) 處理后，對(duì)表達(dá) Incucyte^? 細(xì)胞周期紅色/綠色慢病毒試劑 (INSERT LINK) 的 HT1080 纖維肉瘤細(xì)胞中的細(xì)胞周期階段分布進(jìn)行定量。第 24 h 時(shí)的響應(yīng)顯示于細(xì)胞圖像中（輪廓示出由 Incucyte^? Cell-by-Cell 分析軟件鑒別出的單個(gè)細(xì)胞）(A)。經(jīng)順鉑處理后，處于 G1 期（綠色熒光）的細(xì)胞百分比以濃度和時(shí)間依賴(lài)性方式降低 (B)，處于 S/G2/M 期（紅色熒光）的細(xì)胞百分比則以濃度和時(shí)間依賴(lài)性方式增加 (C)，與其已知的干擾有絲分裂的作用機(jī)制一致。經(jīng) 5FU 處理后，處于 G1 期的細(xì)胞百分比增加 (E)，處于 S/G2/M 期的細(xì)胞百分比降低 (F)，與 5FU 對(duì) DNA 合成的已知影響一致。濃度響應(yīng)曲線（D 和 G）顯示出第 24 h 時(shí)化合物對(duì)細(xì)胞周期的所有可檢測(cè)階段的影響。

圖 6. 追蹤細(xì)胞亞群中的細(xì)胞健康：經(jīng)喜樹(shù)堿（CPT，細(xì)胞毒性化合物）或環(huán)己酰胺（CHX，細(xì)胞抑制化合物）處理后，HT1080 纖維肉瘤細(xì)胞凋亡的時(shí)程。利用 Incucyte^? Nuclight 紅色試劑（細(xì)胞核活力標(biāo)記物）和無(wú)干擾 Incucyte^? Caspase 3/7 綠色試劑（細(xì)胞凋亡指示劑）的多重讀數(shù)確定細(xì)胞健康狀況。細(xì)胞圖像顯示出第 24 h 時(shí)的響應(yīng)，并帶有相關(guān)的分類(lèi)遮蔽（A 和 E）。使用 Incucyte^? Cell-by-Cell 分析軟件工具，基于紅色和綠色熒光對(duì)細(xì)胞亞群進(jìn)行分類(lèi)（B 和 F）。經(jīng) CPT 處理后，紅色細(xì)胞群減少，指示活細(xì)胞損失；紅色和綠色熒光增加，指示早期凋亡；且綠色熒光增加，指示晚期凋亡 (C)。經(jīng) CHX 處理后，未發(fā)生細(xì)胞凋亡 (G)。顯示了早期凋亡細(xì)胞群的濃度響應(yīng)時(shí)程（全部細(xì)胞中表現(xiàn)出紅色和綠色熒光的細(xì)胞百分比，D 和 H）。顯示的值為 3 個(gè)孔的平均值 ± SEM。