可以對(duì)整個(gè)腫瘤細(xì)胞殺傷過(guò)程（> 5 天）進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并可在無(wú)干擾情況下采集上清液樣品，用于測(cè)定細(xì)胞因子濃度。

圖 1.可以通過(guò)結(jié)合使用多種技術(shù)了解事件發(fā)生的先后順序。

在共培養(yǎng)免疫細(xì)胞殺傷分析中觀察到 CD3/CD28 Dynabead 活化的影響。將 SKOV-3 細(xì)胞以 4,000 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種，等待 4 小時(shí)，使其貼壁。然后，將系列稀釋的 Dynabead 添加到孔中，然后再以 10,000 個(gè)細(xì)胞/孔的密度添加 PBMC。每天采集上清液樣品 (10 μL)，用于細(xì)胞因子分析。

時(shí)間數(shù)據(jù)顯示了事件發(fā)生的時(shí)間表，從中可以發(fā)現(xiàn)，首先觀察到細(xì)胞因子分泌增加（A、B），然后效應(yīng)細(xì)胞增殖增加 (C)，這導(dǎo)致靶細(xì)胞數(shù)量減少 (D)。這是在 120 小時(shí)內(nèi)收集的數(shù)據(jù)。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)代表平均值 ± SEM，n = 3。

• 可以從單個(gè)檢測(cè)板中收集數(shù)據(jù)并將數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總，通過(guò)共培養(yǎng)模型更深入地了解生物學(xué)
• 該工作流程既適用于貼壁靶細(xì)胞，也適用于非貼壁靶細(xì)胞

圖 2.易于遵循的工作流程，結(jié)合使用 Incucyte^? 和 iQue^? 進(jìn)行免疫細(xì)胞殺傷分析。

• 自動(dòng)進(jìn)行 T 細(xì)胞亞群的表型分析和分泌細(xì)胞因子的定量分析
• 實(shí)時(shí)觀察和定量分析靶細(xì)胞群和效應(yīng)細(xì)胞群的表型變化

圖 3a. 各平臺(tái)之間的靶細(xì)胞分析具有可比性。

(A) 相差/熒光圖像顯示了 SKOV-3 Nuclight 綠色試劑轉(zhuǎn)染的卵巢癌細(xì)胞（靶細(xì)胞）與未標(biāo)記的 PBMC（效應(yīng)細(xì)胞）的共培養(yǎng)物。

(B) Incucyte^? 軟件可以直接基于圖像檢測(cè)及定量分析靶細(xì)胞（有粉色外沿的綠色對(duì)象），從而確定靶細(xì)胞數(shù)量。

(C) ?2D 密度圖 iQue^? 分析結(jié)果表明了如何從陰性 PBMC 細(xì)胞群中分離出具有綠色標(biāo)記的靶細(xì)胞。

(D) 靶細(xì)胞頻率。

圖 3b.根據(jù)預(yù)定義的設(shè)門(mén)策略自動(dòng)分析 T 細(xì)胞亞群。

TCA 試劑盒方便用戶使用，可以鑒定和定量分析 T 細(xì)胞活化標(biāo)志物，并且最大程度地減少了用戶干預(yù)。

通過(guò)結(jié)合使用多種技術(shù)，可以更深入地了解生物學(xué)。

圖 4.僅通過(guò)一次檢測(cè)即可定量分析抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、細(xì)胞相互作用的變化和 T 細(xì)胞活化。

在非貼壁靶細(xì)胞和 PBMC 的共培養(yǎng)中觀察到抗 hCD3xCD19 BiTE 抗體活化的影響。以 15,000 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種 Ramos 細(xì)胞（綠色）。先將 BiTE 抗體添加到孔中，然后再添加 PBMC（75,000 個(gè)細(xì)胞/孔）。

(A)?熒光強(qiáng)度測(cè)定結(jié)果的減弱表明，BiTE 抗體誘導(dǎo)殺傷 Ramos 細(xì)胞，且呈濃度依賴性。

(B) 細(xì)胞聚集也增加并呈濃度依賴性，這是免疫細(xì)胞殺傷的標(biāo)志。將 BiTE 刺激與 Dynabead 刺激進(jìn)行比較時(shí)，觀察到 T 細(xì)胞活化標(biāo)志物有所差異

(C, D)?在圖像中觀察到形態(tài)變化

(E, F) 可執(zhí)行定性鑒定。這是在 72 小時(shí)內(nèi)收集的數(shù)據(jù)。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)代表平均值 ± SEM，n = 3。